استخراج و تخلیص فریتین از بافت کبد
نویسندگان
چکیده مقاله:
سابقه و هدف: مولکول فریتین با وزن مولکولی 450 کیلودالتون، پروتئین اصلی ذخیره کننده آهن می باشد که از 24 زیرواحد شامل زنجیره های سبک و سنگین تشکیل شده است و هر مولکول آن می تواند 4500 اتم آهن فریک را در خود ذخیره نماید. هدف این مطالعه، تعیین تخلیص فریتین با درجه خلوص بالا جهت استفاده در سیستم های تشخیصی و تحقیقاتی می باشد. مواد و روش ها: در این مطالعه با استفاده از حرارت دادن بافت هموژنیزه شده کبد در دمای 75 درجه سانتیگراد، رسوب دادن با سولفات آمونیوم و کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون با سفادکس G-200، فریتین از این بافت استخراج و تخلیص گردید. بمنظور افزایش درجه خلوص فریتین کروماتوگرافی چرخشی مورد استفاده قرار گرفت. پروتئین حاصل، در ژل پلی آکریلامید در مجاورت سدیم دودسیل سولفات الکتروفورز گردید (SDS-PAGE). از آزمون الایزا و رنگ آمیزی ژل با پتاسیم فری سیانید برای اطمینان از حصول فریتین و از رنگ آمیزی ژل با نیترات نقره جهت اطمینان از درجه خلوص فریتین استفاده شد. جهت تایید وجود زیرواحدهای 19 و 21 کیلودالتون، فریتین حاصله در شرایط احیا در حضور 2-مرکاپتو اتانول الکتروفورز شد. یافته ها: در این روش فریتین کاملا خالص بدست آمد و بازده این روش 100 میکروگرم فریتین به ازای هر گرم بافت تازه کبد بود. الکتروفورز فریتین در شرایط احیا در حضور 2-مرکاپتو اتانول، وجود زیرواحدهای 19 و 21 کیلودالتون را در این پروتئین تایید نمود. نتیجه گیری: روش مورد استفاده جهت استخراج و تخلیص فریتین از بافت کبد منجر به تولید فریتین با درجه خلوص بسیار بالا گردید که برای استفاده در زمینه های تشخیصی و تحقیقاتی مناسب بوده و بازده این روش نسبت به مطالعات دیگر قابل قبول می باشد.
منابع مشابه
تخلیص فریتین از کبد گوسفند و گزارش فعالیت پراکسیدازی مجموعه هیم-فریتین
مقدمه: فریتین(یک پروتئین 24 زیر واحدی با وزن مولکولی 450 کیلودالتون) از زنجیره های سبک و سنگین تشکیل شده است و نقش مهم و اساسی در ذخیره آهن دارد به طوری که می تواند حداکثر 4500 یون فریک(Fe3+) را در درون ساختار خود ذخیره کند. هدف از انجام این تحقیق، تخلیص فریتین از کبد(بافتی که حاوی مقدار زیادی فریتین می باشد) با بازده و خلوص بالا و بررسی فعالیت پراکسیدازی احتمالی آن بود. مواد و روش ها...
متن کاملاستخراج و تخلیص فریتین از جگر گوسفند
در کار حاضر استخراج و تخلیص فریتین از جگر گوسفند و اندازه گیری غلظت آهن موجود در آن مد نظر می باشد. در این روش پس از مراحل هموژنیزه نمودن بافت در بافرتریس در پ .هاش بیولوژیکی و جدا نمودن غشاها و دیوارهای سلولی و همچنین خارج کردن پروتئین های اولیه با استفاده از روش رسوبگیری توسط اثر نمک (سولفات آمونیم 50 درصد) و تنظیم پ . هاش تا نقطه ایزوالکتریک از کروماتوگرافی غربال مولکولی( سفادکس g100 به عنوا...
15 صفحه اولتخلیص فریتین از کبد گوسفند و گزارش فعالیت پراکسیدازی مجموعه هیم-فریتین
مقدمه: فریتین(یک پروتئین 24 زیر واحدی با وزن مولکولی 450 کیلودالتون) از زنجیره های سبک و سنگین تشکیل شده است و نقش مهم و اساسی در ذخیره آهن دارد به طوری که می تواند حداکثر 4500 یون فریک(fe3+) را در درون ساختار خود ذخیره کند. هدف از انجام این تحقیق، تخلیص فریتین از کبد(بافتی که حاوی مقدار زیادی فریتین می باشد) با بازده و خلوص بالا و بررسی فعالیت پراکسیدازی احتمالی آن بود. مواد و روش ها: جهت جداس...
متن کاملاستخراج و تخلیص کلاژن نوعIV از جفت انسان
For the extraction of type IV collagen, the normal placenaes at term were placed under pepsin digestion (once). To purify the extracted collagen, Saltingout and changing the PH were performed (each step twice). All steps of the extraction and purification were controlled by the SDS-PAGE electrophoresis and finally purified collagen with molecular weight 170 and 185 KD chains were obtain...
متن کاملThe effect of cyclosporine on asymmetric antibodies and serum transforming growth factor beta1 in abortion-prone model of mice CBA/J x DBA/2
كچ ي هد فده و هقباس : ي ک ي طقس زورب للع زا اه ي ،ررکم ا لماوع تلاخد ي ژولونوم ي ک ا رد ي ن قم طققس عون ي وراد دقشاب ي س ي روپسولک ي ،ن ح لدم رد طقس شهاک بجوم ي ناو ي CBA/j×DBA/2 م ي تنآ ددرگ ي داب ي اه ي ان و راققتم TGF-β لماوع زا عت مهم يي ن گلماح تشونرس هدننک ي سررب روظنم هب رضاح هعلاطم تسا ي ات ث ي ر اس ي روپسولک ي ن م رب ي از ا ي ن تنآ عون ي داب ي س و اه ي اکوت ي ن TGF...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 7 شماره 1
صفحات 14- 21
تاریخ انتشار 2005-01
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023